**定义：**在生物医疗领域，不同部位的凝胶电泳系统内，其pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小出现差异的现象称为不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳。此技术旨在提升电泳分离的范围和分辨率。

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳采用两种以上的缓冲液成分、pH值和凝胶孔径，并且在电泳过程中形成的电位梯度具有不均匀性。由此产生的浓缩效应、电荷效应及分子筛效应对于生物样品的分离与分析具有重要意义。

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

1. 浓缩效应

在电泳开始时，样品通过浓缩胶被浓缩为高浓度的样品薄层（通常可达到几百倍的浓缩），随后进行分离。当通电后，样品胶与浓缩胶之间迁移的Cl^-离子有效迁移率最高，被称为快离子，而电荷次之的蛋白质则跟随其后，最后是迁移速度最慢的甘氨酸离子（pI=6.0），被称作慢离子。由于快离子的快速移动，形成了低离子浓度区，即低电导区。这种电导与电势梯度相反的特性导致较高的电势梯度生成。该高电势梯度加速了蛋白质及慢离子的迁移，最终在小孔径分离胶中，形成了一层浓缩的蛋白质薄层。

2. 电荷效应

当不同离子进入pH 8.9的小孔径分离胶后，甘氨酸的电泳迁移率会迅速超过蛋白质，高电势梯度则随之消失。在均一的电势梯度及pH的分离胶中，由于不同蛋白质的等电点存在差异，其所带电荷量也不相同。在电场的作用下，蛋白质之间因此受到不同的引力，最终导致各种蛋白质以一定的顺序排列成多个蛋白质区带。

3. 分子筛效应

由于分离胶的孔径相对较小，蛋白质在通过分离胶时所受的阻滞程度各不相同，导致其迁移率差异，从而实现分离。分子筛效应是指样品在通过一定孔径的凝胶过程中，由于分子大小及形状的不同而受到不同程度的阻滞，小分子优先通过，大分子则相对滞后，按照分子大小的顺序排列成各自的区带。

综上所述，不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物医疗研究中发挥着极为重要的作用，通过尊龙凯时提供的先进技术，能够有效提升分离效果，助力研发与诊断工作的开展。